光亲和标记（Photoaffinity Labeling, PAL）是靶点鉴定领域最可靠的手段之一：把光敏基团挂在配体上，光照一瞬间生成高活性中间体，与邻近的蛋白残基形成共价键，于是"弱结合、瞬时结合"这类原本抓不住的相互作用被永久固定下来。过去三十年，这套方法几乎默认绑定 365 nm 紫外光——而紫外光正是它最大的软肋：光毒性强、组织穿透浅、标记效率有限，很多活细胞实验做着做着细胞就死了。

2026 年 10 月，厦门大学黄维院士、潘思骏教授、艾若奇助理教授团队在 Journal of the American Chemical Society 发表的工作，给出了一个绕开紫外的解法：光催化增强的光亲和标记（PE-PAL），首次实现用 450 nm 蓝光高效激活烷基双吖丙啶探针。

一、老问题：催化剂"贴"在药物上，等于给药物穿了件厚棉袄

可见光催化用于 PAL 并不是全新想法，但过去的路子有个致命缺陷——光催化剂必须直接连到药物分子上。这会带来两个后果：

• 空间位阻：催化剂分子量不小，挂在配体上可能直接堵住结合口袋；

• 理化性质漂移：脂溶性、电荷、构象都变了，探针"还是那个分子"的前提就不成立了。

而烷基双吖丙啶恰恰是最适合做"最小化修饰"的光反应基团：体积小（接近一个甲基）、暗处稳定、光照后生成卡宾、交联极快。可惜它的光催化活化策略此前几乎是空白。

二、PE-PAL 的核心：让催化剂和探针"各司其职"

研究团队的解法很干净——拆开。

• 药物探针只保留两样东西：用于光交联的烷基双吖丙啶 + 用于后续富集的生物正交叠氮手柄，其余结构尽量还原母体；

• 铱光催化剂单独制成脂质偶联物或多肽偶联物，不挂在药物上。

两者在 450 nm 蓝光下"相遇"时才共同完成探针的原位激活与交联。催化剂负责传能，探针负责识别，物理上分开，功能上协同。

机制层面，团队给出了一个清晰的判据：光催化剂的三重态能量是关键门槛，只有高于 60 kcal/mol 的才能有效活化烷基双吖丙啶。其中脂质偶联物 Ir-DMPE 在低至 200 nM 浓度下即可高效标记，光毒性相比游离阳离子型催化剂和紫外条件显著降低。

三、验证：从临床药物到细胞外囊泡

团队以吉非替尼、达沙替尼、氟马替尼等已上市临床药物为模型构建系列探针，在活细胞中完成了 EGFR、Bcr-Abl 等靶标的原位分析，并把平台延伸到细胞外囊泡（EV）的液体活检场景——这意味着这套化学不只在培养皿里成立，还有往临床样本分析走的潜力。

对做靶点鉴定的课题组来说，这条路线最实际的价值有三点：

1. 光毒性降下来，活细胞孵育时间可以拉长，弱结合配体有机会被捕获；

1. 最小化修饰让探针保留母体活性，后续竞争实验的说服力更强；

1. 蓝光替代紫外，普通 LED 光源即可，设备门槛大幅降低。

四、方法学落地，卡在试剂供应链上

一项 PAL 研究从设计到出数据，真正耗时间的往往不是光照那几分钟，而是探针本身：

双吖丙啶类探针的合成对光敏操作、低温纯化和异构体分离要求都高，商品化品种集中在少数几个已知配体上。实际课题中更常见的是"母体分子 + 指定光反应基团 + 指定手柄 + 指定连接臂长度"的组合需求，这类只能靠定制合成解决。

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