产品概述

生物素标记Niraparib（Biotin-Niraparib） 是在PARP抑制剂尼拉帕利分子上引入生物素标签的功能性探针。尼拉帕利（Niraparib, Zejula®）是第三代PARP1/2抑制剂，通过捕获PARP酶于DNA损伤位点产生"合成致死"效应，临床获批用于卵巢癌、输卵管癌和原发性腹膜癌的维持治疗。生物素标记版本在保留PARP催化抑制和DNA-PARP trapping能力的同时，引入了亲和富集功能，为PARP靶点engagement验证、耐药机制研究和新型生物标志物发现提供了直接可用的化学工具。

标记策略与技术特点

分子设计考量

Niraparib的核心药效团为吲哚酮骨架，通过氢键与PARP催化中心的甘氨酸残基结合。标记位点设计遵循以下原则：

• 位点选择：在Niraparib分子的哌啶侧链远端进行修饰，该位点远离PARP催化结合口袋，对抑制活性影响极小

• 连接臂设计：采用PEG4柔性连接臂（约20 Å），确保生物素标签不会干扰药物与PARP酶的结合，同时便于链霉亲和素磁珠的接近和富集

• 活性保留：标记后产物对PARP1的IC50偏移控制在3倍以内（相对于游离Niraparib），确保探针的生物学相关性

质控标准

核心应用场景

应用一：PARP靶点亲和富集与蛋白组学

生物素标记Niraparib可作为"诱饵"探针，从细胞裂解液中富集PARP1/2及其相互作用蛋白：

1. 靶点验证：将探针与细胞裂解液孵育，链霉亲和素磁珠富集后Western Blot检测PARP1/2

2. 相互作用组分析：LC-MS/MS鉴定PARP复合物的新组分，揭示DNA损伤修复网络的组成

3. 竞争实验：用游离Niraparib竞争，区分特异性靶点与非特异性结合蛋白

应用二：耐药机制研究

PARP抑制剂耐药是临床面临的重大挑战，常见机制包括PARP1突变、药物外排增加、同源重组修复恢复等。生物素标记Niraparib可用于：

• 结合力评估：比较野生型和耐药突变型PARP1与探针的结合能力差异

• 细胞摄取分析：结合荧光标记链霉亲和素，定量分析敏感株和耐药株的药物摄取差异

• 靶点表达动态：在DNA损伤诱导不同时间点，pull-down评估PARP1的表达和修饰状态变化

应用三：DNA损伤修复通路研究

PARP抑制剂通过trapping PARP于DNA损伤位点发挥作用。生物素标记探针可用于：

• DNA-PARP复合物富集：从染色质组分中富集被trapped的PARP-DNA复合物

• 损伤位点定位：结合ChIP-seq策略，在全基因组水平定位PARP trapping位点

• 修复动力学研究：时间梯度pull-down，追踪DNA损伤修复过程中PARP的动态变化

产品优势

技术参数

使用建议

1. 储存液：无水DMSO配制10 mM储存液，分装避免冻融

2. Pull-down浓度：1-5 μM，孵育30-60 min（4°C）

3. 对照：设置10倍过量游离Niraparib竞争对照

4. 洗涤：建议高盐洗涤（300-500 mM NaCl）降低非特异性结合

联系我们

纳孚生物 — 专业化合物定制合成与生物素标记服务商