引言：肠道微生物代谢物的"分子对话"

牛磺脱氧胆酸（TDCA）是一种结合型次级胆汁酸，由肠道菌群代谢产生，参与脂质吸收及FXR/TGR5受体激活。近年研究发现，TDCA在代谢综合征、非酒精性脂肪性肝病、2型糖尿病及炎症性肠病的病理进程中扮演重要角色。然而，阐明TDCA如何与宿主细胞中的特定蛋白质相互作用，仍是该领域亟待解决的核心问题。生物素标记牛磺脱氧胆酸的推出，为胆汁酸受体靶点鉴定、转运蛋白功能研究及肠-宿主互作机制探索提供了强有力的化学工具。

产品简介：位点特异性标记策略

TDCA分子由疏水的类固醇核（3α-OH与12α-OH）及亲水的牛磺酸侧链（-NH-CH₂-CH₂-SO₃H）构成。纳孚生物采用位点特异性标记策略，在牛磺酸侧链的氨基端或胆酸核的羟基位置引入生物素基团，构建生物素标记牛磺脱氧胆酸（Biotin-TDCA）。生物素通过酰胺键或醚键与TDCA连接，保留了胆汁酸核的完整三维构型——这是确保其能被FXR、TGR5等受体正确识别的前提。产品在水中溶解度优于母体TDCA，便于细胞培养及体外蛋白实验使用；结构经MS与NMR双重确证，标记位点明确，批次一致。

核心应用场景

场景一：TGR5/FXR受体亲和力验证（Pull-down + WB）

TGR5与FXR是胆汁酸信号转导中最重要的两个受体，分别介导快速膜信号与慢速核转录调控。验证TDCA与这两个受体的直接结合是阐明其功能的关键步骤。实验流程为：将生物素标记TDCA与过表达TGR5或FXR的细胞裂解液共孵育，随后加入链霉亲和素磁珠进行Pull-down；捕获的蛋白经洗涤后，通过Western Blot使用TGR5或FXR特异性抗体检测。为排除非特异性吸附，可设置对照：仅加入磁珠而不加探针、加入过量未标记TDCA进行竞争抑制、使用不表达目标受体的细胞裂解液作为阴性对照。该策略直观、可重复，是受体-配体互作验证的经典范式。

场景二：肠道菌群代谢物-宿主蛋白互作系统研究

生物素标记TDCA可作为"探针锚点"，用于系统筛选与其发生相互作用的宿主蛋白。在蛋白质组学实验中，将生物素-TDCA与肠道上皮细胞裂解液共孵育，经链霉亲和素磁珠捕获后，洗脱蛋白进行LC-MS/MS分析。通过对比生物素-TDCA组与游离生物素对照组的富集蛋白列表，可在全蛋白质组尺度上发现TDCA的新型结合蛋白，包括已知的FXR、TGR5伴侣蛋白及潜在的新受体或转运蛋白。该策略对于揭示胆汁酸代谢物在肠道稳态调控中的多靶点网络具有重要意义。

场景三：胆汁酸转运蛋白（ASBT/NTCP）功能研究

ASBT（SLC10A2）与NTCP（SLC10A1）是介导胆汁酸肠肝循环的关键膜蛋白。利用生物素标记TDCA，可在表达ASBT的MDCK细胞模型中定量评估转运蛋白的底物结合与转运能力。细胞与生物素-TDCA共孵育后，通过细胞裂解与链霉亲和素磁珠捕获，结合链霉亲和素-HRP进行定量检测，从而评估TDCA的摄取量。通过基因敲除或转运体抑制剂处理，可验证摄取的ASBT依赖性，为胆汁酸转运体药理学及转运机制研究提供灵敏工具。

产品优势

• 位点明确的标记策略：在牛磺酸侧链氨基或类固醇核羟基位点精准标记，确保生物素标签不干扰受体结合域的构象识别。

• 胆汁酸核完整保留：标记过程对胆酸骨架的3α,12α-二羟基结构及A/B环顺式稠合构型无破坏，维持TDCA与FXR、TGR5等受体的天然亲和力。

• 高溶解性：相较于母体TDCA，生物素标记后的TDCA亲水性显著改善，可直接配制于PBS或细胞培养基中，无需有机溶剂助溶，降低细胞毒性。

• 结构经MS/NMR确证，附带完整COA：每批次产品均提供质谱分子量确认与核磁共振结构表征数据，确保结构准确无误，满足高水平科研论文对试剂质量的严格要求。

关于纳孚生物的定制服务

纳孚生物在胆汁酸类化合物的结构修饰与生物素标记方面积累了深厚的技术经验。除TDCA外，我们还可提供GDCA、UDCA、CDCA等多种胆汁酸衍生物的生物素标记、荧光标记及PEG化修饰服务。针对不同研究目标（受体结合、转运体研究、代谢组学探针），我们可协助设计最优的标记位点与连接臂策略，并提供从毫克到克级的灵活供货。

如果您正在从事肠道微生物组、胆汁酸信号转导或代谢性疾病研究，欢迎联系纳孚生物就生物素标记牛磺脱氧胆酸的应用方案进行咨询，我们的技术团队将为您提供专业的合成建议与实验支持。

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