酰胺键广泛存在于药物分子和天然产物中，我们可以从一点看出它的重要性，由于它的重要性，它的合成受到了合成化学家们的广泛关注和研究。其中酸胺缩合是有机合成中使用最广泛的方法之一，方法多种多样，缩合试剂也多种多样如HATU，EDCI，T3P等等。使用HATU或T3P的时候，我们很多时候是不需要加活化剂的，然而当使用EDCI作为缩合剂的时候，往往需要与HOBt 搭配，才能避免不必要的重排脲副产物。

图片来源：网络

并不是所有的副产物都是能分析出来的，当你绞尽脑汁在分析你的未知副产物是如何产生时，你可能万万没想到，你的杂质可能来自于你购买的活化剂HOBt。最近，来自Bristol-Myers Squibb（百时美施贵宝公司）的化学家们最近在美国化学会旗下著名期刊Org. Process Res. Dev.撰文分析了他们在合成研究过程中发现的酸胺缩合副产物来自于购买的活化剂HOBt中的杂质：水合肼。如下是HOBT来自于不同供应商的反应结果，从结果可以看出，差异性还是比较大的。

图片来源：Org. Process Res. Dev.

因为水合肼和其衍生物是有基因毒性的，因此Bristol-Myers Squibb的化学家们想分析这个水合肼杂质是怎么来的。这个就不得不从HOBt的合成来讲起了，HOBt的合成见下图。现在有两种可能，一种是购买时就含有水合肼杂质，还有一种可能是HOBt放置时间太长分解了。作者用纯的HOBT放置12个月，然后再进行实验，得到的结果与当初的结果是一样的，这就说明HOBt的杂质是来自于供应商的试剂。

图片来源：Org. Process Res. Dev.

HOBt里有水合肼的存在，那么就不得不提里面存在的第二个可能的杂质1-氯-2-硝基苯，1-氯-2-硝基苯也是有潜在的基因毒性的。由于这两个化合物的潜在基因毒性，因此Bristol-Myers Squibb的化学家们在本文中还介绍了如何控制这两个杂质的含量，以及如何检测这些杂质的含量，大家如果有兴趣，可下下来仔细阅读。在这里小编就不陈述了。下图是他们用开发的方法测量的不同供应商HOBt里的杂质含量。

图片来源：Org. Process Res. Dev.